ارزیابی فعالیت آنزیم اندوگلوکاناز (cmcase) در قارچ سلولایتیک trichoderma longibrachiatum

thesis
abstract

سلولز فراوان ترین پلیمر زیستی روی زمین است و تقریباً 50% بیوسفر را تشکیل می دهد. این هوموپلیمر خطی از واحدهای d-گلوکز تشکیل شده است که توسط پیوند های بتاگلیکوزیدی به هم متصل می شوند. سلولز توسط آنزیم های تجزیه کننده سلولز یا سلولازها، به گلوکز تبدیل می گردد. سلولاز یک سیستم آنزیمیست که از سه گروه آنزیمی اندوگلوکاناز، اگزوگلوکاناز و بتاگلوکوزیداز تشکیل شده است. اندوگلوکاناز با تجزیه تصادفی پیوندهای داخلی زنجیره سلولزی، زنجیره های کوتاه تر الیگوساکاریدی ایجاد می کند. اگزوگلوکاناز مونومرها و دایمرهای گلوکزی را از انتهای زنجیره گلوکان جدا کرده و بتاگلوکوزیداز دایمرهای گلوکزی را هیدرولیز و تولید گلوکز می کند. این آنزیم ها کاربرد گسترده ای در صنایع غذایی، نساجی، کاغذ، تولید سوخت های زیستی وsingle cell protein دارند. دامنه گسترده ای از میکروارگانیسم ها توانایی تولید سلولاز و هضم سلولز را دارا می باشند. به دلیل کاربرد گسترده آنزیم های سلولاز، تحقیقات به سمت تولید اقتصادی آنهاست. از این رو تحقیقات بسیاری برای کاهش هزینه و تولید اقتصادی آنزیم های سلولایتیک انجام شده است که از آنجمله می توان به ایجاد تغییرات ژنتیکی در میکروارگانیسم های سلولایتیک و جستجو برای یافتن موجوداتی با توانایی بالای هضم سلولز اشاره کرد. ساده ترین و کم هزینه ترین روش، یافتن موجوداتی با توانایی بالای سلولایتیک است. نظر به اینکه سلولز مهم ترین جزء رژیم غذایی نشخوارکنندگان است، میکروارگانیسم های شکمبه این حیوانات توانایی تولید آنزیم های سلولایتیک وهضم سلولز را دارند. در این راستا در مطالعه ای که بر روی موجودات سلولایتیک شکمبه گوسفند تغذیه شده با رژیم غذای سلولزی انجام گرفت، یک گونه قارچ هایپرسلولایتیک از دیواره شکمبه جداسازی شد. در تحقیق حاضر قارچ سلولایتیک ایزوله شده، شناسایی مولکولی گردید و فعالیت سلولازی آن ارزیابی شد. نتیجه این تحقیق موید نتیجه بررسی های مورفولوژیک بود و این قارچ از گونه trichoderma longibrachiatum تشخیص داده شد. دمای بهینه برای رشد این قارچ بر اساس نتایج حاصله از آزمایشات اندازه گیری وزن خشک میسلیوم 0c37 تعیین گردید.آزمایشات آنزیمی به منظور تعیین غلظت بهینه آنزیم و سوبسترا، اسیدیته، دما و مدت زمان انکوباسیون آنزیم اندوگلوکاناز مترشحه توسط این قارچ با روش somogi-nelson انجام گرفت و نتایج به ترتیب gµ700، 25/1%(w/v)، 6، 0c50 و 60 دقیقه بود. نتایج cmc زایموگرافی حاکی از عدم وجود ایزوزایم بود و وزن مولکولی آنزیم 118kd برآورد شد. میزان km و vmax آنزیم به ترتیب 32/3 گرم در لیتر و 4/4 میکرومول گلوکز در میلی گرم پروتئین در ساعت بود. این قارچ به عنوان یک میکروارگانیسم ایزوله شده از منابع بومی، به دلیل سهولت رشد در محیط های هوازی و بی هوازی و به دلیل قدرت سلولایتیکی بالا می تواند کاربرد گسترده ای در صنایع مختلف داشته باشد.

similar resources

بررسی فعالیت آنزیم بتا- ۱ و ۴ اندوگلوکاناز در سه نماتد بیمارگر گیاهی

دیواره سلولی گیاه میزبان، سد مکانیکی اصلی برای نفوذ و مهاجرت نماتدهای انگل گیاهی محسوب می­شود. این نماتدها جهت تجزیه دیواره سلولی، انواع مختلفی از آنزیم­های تجزیه کننده دیواره سلولی را ترشح می‌کنند. بتا- 1 و 4 اندوگلوکاناز از اولین آنزیم­های تجزیه کننده شناخته شده در این ارتباط است. در این پژوهش، فعالیت آنزیم مذکور در سه گونه شاملMeloidogyne incognita  ،Pratylenchus loosi ...

full text

تأثیر حلال های آلی بر فعالیت و پایداری آنزیم اندوگلوکاناز و پایدارسازی آن با ساکارز

به کارگیری آنزیم‌ها در حلال‌های آلی برای مصارف صنعتی و صنایع داروسازی حائز اهمیت می‌باشد. کاهش فعالیت آنزیم‌ها در حضور حلال‌های آلی می‌تواند به دلیل سخت شدن ساختار پروتئینی آنزیم‌ها در حلال‌های آلی ، واسرشتگی و مهار آنزیمی باشد. معمولا پایداری آنزیم‌ها نیز در حلال‌های آلی کاهش می‌یابد. برای رفع این مشکل می توان از روش‌های پایدارسازی پروتئین‌ها نظیر افزودنی‌ها، مهندسی پروتئین و تغییرات شیمیایی...

full text

Purification and Characterization of an Endo-(1,3)-beta-d-Glucanase from Trichoderma longibrachiatum.

A laminarinase [endo-(1,3)-beta-d-glucanase] has been purified from Trichoderma longibrachiatum cultivated with d-glucose as the growth substrate. The enzyme was found to hydrolyze laminarin to oligosaccharides varying in size from glucose to pentaose and to lesser amounts of larger oligosaccharides. The enzyme was unable to cleave laminaribiose but hydrolyzed triose to laminaribiose and glucos...

full text

Peptaibiomics: microheterogeneity, dynamics, and sequences of trichobrachins, peptaibiotics from Trichoderma parceramosum Bissett (T. longibrachiatum Rifai).

From the culture broth of the filamentous fungus Trichoderma parceramosum, strain CBS 936.69, a mixture of polypeptide antibiotics (pepaibiotics), named trichobrachin (TB), was isolated. Three major groups designated TB I, TB II, and TB III could be separated and isolated by preparative TLC on silica gel. Individual peptides of these three groups were sequenced by on-line LC/ESI-MS(n). The mixt...

full text

بیان هترولوگ آنزیم کیتیناز 36 کیلو دالتونی از قارچ Trichoderma atroviride در میزبان پروکاریوتی

آنزیم‌های کیتینولیتیک در تجزیه پسماندهای کیتینی نظیر پوسته سخت‌پوستان و دیواره سلولی قارچ‌ها و تولید الیگوساکاریدها از کیتین نقش دارند. خصوصیات کاتالیتیک آنها، این آنزیم‌ها را هدف مناسبی جهت استفاده درصنعت یا به عنوان بیوکنترل قرار داده‌ است. در این مطالعه جهت تکثیر و همسانه‌سازی ژن chit36 از جدایه بومی ایران Trichoderma atroviride PTCC5220، آغازگرهای اختصاصی (chit36pf/chi36r) طراحی و پس از تکث...

full text

Development of permeable reactive biobarrier for the removal of PAHs by Trichoderma longibrachiatum.

In this work, the formation of permeable reactive biobarriers (PRBBs) using Trichoderma longibrachiatum over nylon sponge as bioreactive medium for removal of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) was studied. Colony formation was pretested without PAH presence by inoculation of fungus into nylon sponge. The fungus formed a large quantity of strongly adhesive biofilm among nylon sponge. After...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه صنعتی اصفهان - دانشکده کشاورزی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023